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医学生物学实验重点
移液管的使用：吸—擦—调—放量取4.5毫升液体用什么移液管：应该用10ml吸量管（注意看书p5下方吸量管的种类和使用）
微量加样器的使用：装吸液头之后扭一下，保证不漏气，吸液到第一停止点，缓慢释放按钮，停留1s，滑出，擦去吸液头外面的液体，不擦尖端。放液先到第一停止点，停1s，到第二停止点，放液要贴壁，也是滑出。
分光光度法的原理：Lambert-Beer定律光吸收和什么因素有关A=-lgT直接比较法（公式法）、标准曲线法。标准曲线法A为纵坐标，浓度为横坐标，取直线部分作定量依据。
凝胶层析：分子量大的先出，考了一道给了四种蛋白质的分子量，问哪个先出的。还考了一道分离不同分子量的蛋白质用什么层析的。（亲和层析、薄层层析的原理最好也看看吧）
离子交换层析：和后边的血清γ球蛋白的实验一起考了好几道题，等电点的概念还有离子交换层析的原理一定要清楚，题目会变换一下流动相的ph什么的来考。咱们实验用的是DEAE—纤维素阴离子交换剂，具有碱性基团，和流动相中的阴离子进行交换。
离心机的使用：尤其注意平衡哦~根据转速的离心机的分类低速<6000r/min<高速<25000r/min<超速
各种离心方法：差速离心、密度梯度离心（速度区带离心、等密度离心）、超速离心，要知道各种离心方法适用于分离什么。
光学显微镜的操作：左眼观察右眼看图，左手调焦右手移片或绘图。低倍镜转到高倍镜需要光圈调大。油镜也出了一个选项，可以瞅一眼。
蟾蜍软骨细胞中性红染色：淡红色的是细胞核和核仁，玫瑰红色的是高尔基液泡。
大蒜根尖用盐酸水解之后为什么要用蒸馏水洗3s
亚细胞组分沉降的先后：最先离心出的是细胞核，然后是线粒体，最终上清中是微粒体。沉降速度：细胞核>线粒体>微粒体。细胞核用甲基绿—派洛宁染色，甲基绿染的是DNA，绿色，派洛宁染RNA，红色。为什么用冷玻片？细胞核过酒精是密度由高到低，每次5min。在丙酮中分色时间过长会？詹纳斯绿B染线粒体，绿色。
永久制片观察：铁苏木精染线粒体：蓝色。镀银染色：高尔基体，网状，深棕色。考马斯亮蓝染微丝束，蓝色。DNA的特异显示方法（feulgen反应）：60°C盐酸水解使醛基暴露，和Schiff氏试剂（无色亚硫酸品红）反应成紫红色化合物。考了一道为什么和希夫试剂反应要放在抽屉里，避光防止变质。胞质被亮绿染成绿色。
乳酸脱氢酶在细胞中的定位分析：乳酸脱氢酶催化乳酸脱氢，传递给NAD+,显色的是四唑盐被还原成的双甲臜蓝紫色沉淀。
糖原同样是希夫试剂和游离醛基反应，成为PAS反应。苏丹黑染脂类为黑色。
蛋白质含量的folin—酚法测定：酪氨酸带有酚基，碱性条件下与铜离子螯合，使磷钼酸—磷钨酸还原生成蓝紫色化合物，深浅可用分光光度法测，与蛋白质含量成正比。（考了铜离子和氧化还原反应、空白对照管）
血清γ球蛋白：前一部分初步分离是设计性实验哦~要提前自己设计，写实验报告，实验之后再写一份~考了好几道离子交换柱层析的，改流动相的ph先流出的是哪个蛋白啊，
DEAE—纤维素的处理啊，层析的步骤顺序啊，还有用20%磺基水杨酸检验蛋白质。SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳考了SDS作用、β巯基乙醇的作用、催化剂和引发剂、上下各是正负极、显色、浓缩胶和分离胶的上下和缓冲液的ph、浓缩胶的作用、分离胶的作用（分
子筛）、氯离子蛋白质甘氨酸的迁移率、垂直板不连续电泳。染色用的是考马斯亮蓝，指示剂用的是溴酚蓝。这个实验考了好多啊，好好看啊~！
血清谷丙转氨酶活性测定：血清提供的是酶（不是底物不是产物哦~）、丙酮酸和2,4—二硝基苯肼在碱性条件下生成棕色的丙酮酸二硝基苯腙、活性单位是每毫升血清在ph=7.4,37°C保温30min每生成2.5μg丙酮酸作为一个酶活性单位。520nm比色。
唾液淀粉酶透析之后活性下降是缺了什么。提取酶主要是看酶的比活力还是神马。。。
其实实验步骤和原理明白了就好了，还要看看书前面的那些操作使用方法和原理。
量取4.5毫升液体用什么移液管：应该用10ml吸量管（注意看书p5下方吸量管的种类和使用）
微量加样器的使用：装吸液头之后扭一下，保证不漏气，吸液到第一停止点，缓慢释放按钮，停留1s，滑出，擦去吸液头外面的液体，不擦尖端。放液先到第一停止点，停1s，到第二停止点，放液要贴壁，也是滑出。
分光光度法的原理：Lambert-Beer定律光吸收和什么因素有关A=-lgT直接比较法（公式法）、标准曲线法。标准曲线法A为纵坐标，浓度为横坐标，取直线部分作定量依据。
凝胶层析：分子量大的先出，考了一道给了四种蛋白质的分子量，问哪个先出的。还考了一道分离不同分子量的蛋白质用什么层析的。（亲和层析、薄层层析的原理最好也看看吧）
离子交换层析：和后边的血清γ球蛋白的实验一起考了好几道题，等电点的概念还有离子交换层析的原理一定要清楚，题目会变换一下流动相的ph什么的来考。咱们实验用的是DEAE—纤维素阴离子交换剂，具有碱性基团，和流动相中的阴离子进行交换。
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各种离心方法：差速离心、密度梯度离心（速度区带离心、等密度离心）、超速离心，要知道各种离心方法适用于分离什么。
光学显微镜的操作：左眼观察右眼看图，左手调焦右手移片或绘图。低倍镜转到高倍镜需要光圈调大。油镜也出了一个选项，可以瞅一眼。
蟾蜍软骨细胞中性红染色：淡红色的是细胞核和核仁，玫瑰红色的是高尔基液泡。
大蒜根尖用盐酸水解之后为什么要用蒸馏水洗3s
亚细胞组分沉降的先后：最先离心出的是细胞核，然后是线粒体，最终上清中是微粒体。沉降速度：细胞核>线粒体>微粒体。细胞核用甲基绿—派洛宁染色，甲基绿染的是DNA，绿色，派洛宁染RNA，红色。为什么用冷玻片？细胞核过酒精是密度由高到低，每次3min。在丙酮中分色时间过长会？詹纳斯绿B染线粒体，绿色。
永久制片观察：铁苏木精染线粒体：蓝色。镀银染色：高尔基体，网状，深棕色。考马斯亮蓝染微丝束，蓝色。DNA的特异显示方法（feulgen反应）：60°C盐酸水解使醛基暴露，和Schiff氏试剂（无色亚硫酸品红）反应成紫红色化合物。考了一道为什么和希夫试剂反应要放在抽屉里，避光防止变质。胞质被亮绿染成绿色。
乳酸脱氢酶在细胞中的定位分析：乳酸脱氢酶催化乳酸脱氢，传递给NAD+,显色的是四唑盐被还原成的双甲臜蓝紫色沉淀。
糖原同样是希夫试剂和游离醛基反应，成为PAS反应。苏丹黑染脂类为黑色。
蛋白质含量的folin—酚法测定：酪氨酸带有酚基，碱性条件下与铜离子螯合，使磷钼酸—磷钨酸还原生成蓝紫色化合物，深浅可用分光光度法测，与蛋白质含量成正比。（考了铜离子和氧化还原反应、空白对照管）
血清γ球蛋白：前一部分初步分离是设计性实验哦~要提前自己设计，写实验报告，实验之后再写一份~考了好几道离子交换柱层析的，改流动相的ph先流出的是哪个蛋白啊，DEAE—纤维素的处理啊，层析的步骤顺序啊，还有用20%磺基水杨酸检验蛋白质。SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳考了SDS作用、β巯基乙醇的作用、催化剂和引发剂、上下各是正负极、显色、浓缩胶和分离胶的上下和缓冲液的ph、浓缩胶的作用、分离胶的作用（分子筛）、氯离子蛋白质甘氨酸的迁移率、垂直板不连续电泳。染色用的是考马斯亮蓝，指示剂用的是溴酚蓝。这个实验考了好多啊，好好看啊~！
血清谷丙转氨酶活性测定：血清提供的是酶（不是底物不是产物哦~）、丙酮酸和2,4—二硝基苯肼在碱性条件下生成棕色的丙酮酸二硝基苯腙、活性单位是每毫升血清在ph=7.4,37°C保温30min每生成2.5μg丙酮酸作为一个酶活性单位。520nm比色。
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