(热门)细胞生物学实验报告
在我们平凡的日常里,报告的适用范围越来越广泛,报告包含标题、正文、结尾等。我们应当如何写报告呢?以下是小编整理的细胞生物学实验报告,希望对大家有所帮助。
细胞生物学实验报告1
实验目的
⒈学习并掌握动物细胞培养的无菌操作技术。
⒉了解原代细胞培养的基本方法及操作过程。
⒊学习细胞计数及营养液的配制。
实验原理
⒈细胞原代培养
原代细胞培养是指直接从动物体内获取的细胞、组织和器官,经体外培养后,直到第一次传代为止。这种培养,首先用无菌操作的方法,从动物体内取出所需的组织(或器官),经消化,分解成单个游离细胞,在人工培养下,使其不断的生长及繁殖。
细胞培养是一种操作繁琐而又要求十分严谨的实验技术。要使细胞能在体外长期生长,必须满足两个基本要求:一是供给细胞存活所必须的条件,如适量的水、无机盐、氨基酸、维生素、葡萄糖及其有关的生长因子、氧气、适宜的温度,注意外环境酸碱度与渗透压的调节。二是严格控制无菌条件。
⒉细胞死活鉴定死活细胞的鉴定方法有很多种,常用的有染色法和仪器分析法。染色法是常用的'细胞死活鉴定方法,简便,易于操作。不同的死活细胞鉴定方法有各自不同具体的反应机理,但无论采用何种办法,都是利用了死活细胞在生理机能和性质上的差异。
染色法分化学染色法和荧光染色法,根据染色机理的不同,染料或使死细胞着色,或使活细胞着色。
死活细胞在生理机能和性质上的差异主要包括:
☆死活细胞细胞膜通透性的差异:活细胞的细胞膜是一种选择性膜,对细胞起保护和屏障作用,只允许物质选择性的通过;而细胞死亡之后,细胞膜受损,通透性增加。常用的以台盼蓝鉴别细胞死活的方法就是利用了这一性质。台盼蓝,又称锥蓝,是一种阴离子型染料,不能透过完整的细胞膜。所以经台盼蓝染色后只能使死细胞着色,而活细胞不被着色。甲基蓝有类似的染色机理。植物细胞的质壁分离也可鉴定死活。
☆死活细胞在代谢上的差异:是采用美蓝染料鉴定酵母细胞死活的依据。美蓝是一种无毒染料,氧化型为蓝色,还原型为无色。由于活细胞中新陈代谢的作用,使细胞内具有较强的还原能力,能使美蓝从蓝色的氧化性变为无色的还原型,因此美蓝染色后活的酵母细胞无色;而死细胞或代谢缓慢的老细胞,则因它们的无还原能力或还原能力极弱,使美蓝处于氧化态,从而被染成蓝色或淡蓝色。
除此之外,还有一些细胞器的专有染料。如液泡系的专有染料中性红。中性红是一种低毒性染料,可以使活细胞液泡着红色,而细胞质和细胞核不被着色;死细胞的液泡不被着色或浅染,染料弥散于整个细胞中,细胞核和细胞质被染成红色。有时侯为了增加染色效果可以将两种染料结合使用,如甲基蓝-中性红混合染色法。
实验用品
⒈材料小白鼠
⒉试剂
台盼蓝、伊红、PBS缓冲液、细胞培养液(含生长因子)
⒊器材
剪子、棉球、75%酒精、移液枪、无菌操作台、正置光学显微镜、倒置光学显微镜、解剖盘、滴管、离心管、离心机、注射器、Eppendorf管、培养皿、酒精灯、塑料培养皿、载玻片、盖玻片、血细胞计数板
实验步骤
⒈取材
取小鼠一只,采用断头法处死。清水洗小鼠浸入75%酒精中消毒3min,取出转入超净工作台内的解剖盘中,无菌操作打开腹腔,取出其脾脏,除去其周围的脂肪组织,并用PBS液自上而下淋洗1-2次,转入无菌培养皿中待用。
⒉分离脾细胞
用滴管向培养皿中注入30滴PBS缓冲液,再用“L”型针头注射器在皿中吸取0.2毫升PBS液注入脾脏,注射时沿长轴注射。然后再用针头在脾脏上扎眼,并用“L”型针头轻轻刮出脾细胞。在均匀吹匀脾脏细胞。
吸取上述分离的单个脾细胞悬液,放入Eppendorf管中,使量至1mL,以1000r/min离心5min。⒊培养脾细胞
取塑料培养皿一套,用移液枪吸取培养液2mL加入塑料皿中,并将皿标记待用。取离心后的Eppendorf管,弃去上清液,用移液枪(200ul)吸取塑料皿中的培养液400ul加入弃去上清的Eppendorf管中,用枪头吹匀管底的脾细胞,吸取200ul脾细胞悬液接种于上述塑料皿中,混匀后放入37°C,5%CO2的培养箱中培养。
⒋配制染液
用生理盐水配成5%台盼蓝染液,备用。⒌染色
取0.5mL细胞悬浊液放入试管中,加入1-2滴染液。混合。2-5min后将细胞放在血细胞计数板上观察死活情况,注意不要有
气泡产生,放大倍数为10x10。染色后活细胞不着色,死细胞显示蓝色。注意染色时间不能超过15min,否则染液将细胞毒杀。
⒍计数
在10x10倍的显微镜下观察,计算血细胞计数板的4个4小方格的细胞数量。包括细胞总数与死细胞数量。压线者计上不计下,计左不计右。
⒎计算细胞活力
根据公式:细胞活力=(总细胞数-死细胞数)/总细胞数×100%
实验结果
台盼蓝染色后的细胞(10x10)伊红染色后的细胞(10x10)
总细胞数和活细胞数统计表(10×10)
项目自己培养细胞老师培养细胞总细胞数个/ml活细胞数个/ml细胞活力1.4×1067.5×1053.0×1055.5×10521.4%73.3%分析与讨论
⒈结果分析
本次实验中我们小组自己培养细胞所测细胞活力为21.4%,并不算高,分析得应有以下原因可能影响实验结果(包括误差):
⑴若在无菌操作的过程中操作不规范,导致染菌,会极大的影响观察,导致实验失败。
⑵若在离心分离呈单细胞的过程中离心机转速过快或时间过长很可能会导致细胞破裂,导致小鼠脾细胞大量死亡。
⑶染色时间过长,或观察时间过长都会导致染色试剂将细胞杀死,使细胞活力骤降,这是导致细胞活力比较低的重要原因。
⑷实验中的一些操作不正确或不规范的情况、计算带来的误差等也会直接导致实验误差。
⒉注意事项
⑴严格进行动物消毒,需用75%酒精消毒。
⑵严格进行无菌操作,防止细菌、霉菌、支原体污染,避免化学物质污染。
⑶吸取液体前,瓶口和吸管硬行火焰消毒;吸取液体时,避免碰撞。
⑷离心管入台前,管口、管壁应消毒。
⑸实验者离开超净台时,要随时用肘部关闭工作窗。
⑹器材使用时既要注意用火焰消毒,又要防止烫伤、烫死细胞。
细胞生物学实验报告2
医学细胞生物学是医学临床专业的主干课程之一。学习此门课程对于我们从细胞水平理解生命现象,阐述机体发病原理及选择最佳治疗方案提供理论依据。同时,医学细胞生物学又是一门实验操作性极强的学科,实验教学不仅是此门课程教学工作的重要组成部分,也直接关系到学生的动手能力、综合素质,是临床学生正式走上医疗岗位前的一种必需的培训。
但在实际的教学过程中,教师在实验课中重点讲授实验的基本原理,实验所要达到的目的,并在实验前已将实验所需的各种试剂配好,学生按实验指导书无需思考地将相应的试剂按顺序加入,然后得到一个合理的结果就可以。对于学习主动性差的学生来讲,他仅仅是观察到一个实验现象。因此,我们感到实验课程的内容和设计并没有达到我们最初预想的培养目的。那么,如何将实验中所观察到的现象很好地与理论知识结合起来,调动学生的主观能动性,让被动的学习变为主动以达到预期的教学效果呢?为了解决这一问题,我们对现有的实验课作了相应的改革,结合课堂理论教学,借鉴其他医学院校的经验,让学生自我设计,自我验证,以加深对理论知识的理解,提高教学质量。
在制定改革方案之前,我们与学生进行了多次深入的交流,从他们反馈回来的信息了解到,当代大学生具有较强的求知欲,渴望掌握当代相关学科领域中的新进展、新理论及相应的新技术,对于实验课教学环节有着殷切的希望,希望能够通过专业技能训练,掌握几门实用性强的技术,以提高自身在就业市场上的竞争力。与此同时,我们也深深感到他们的动手能力差,独立处理问题、解决问题的能力较弱,吃苦钻研精神不够。此外,应试学习的现象在他们身上体现得较为普遍。综合以上的分析,对医学细胞生物学实验课教学环节提出如下改革建议:
一、加强实验基本技能的训练,培养科学严谨的学习作风
实验包括显微镜的使用方法,生物绘图的基本技巧,细胞形态结构观察,细胞亚微结构的分离与观察。主要目的是使学生掌握细胞学研究和观察的基本实验方法。此外,我们对实验中的操作细节进行严格的要求,以培养学生良好的实验习惯及严谨的学习作风,这对于临床专业的学生尤为重要。
二、开展综合性、设计性实验,调动学生的主观能动性,提高动手能力,将被动学习变为主动学习
结合理论课教学环节及相关临床应用,提出问题,由学生独立完成实验方案设计,包括实验相关原理,材料选择,试剂配制,试验现象的观察记录,以及最后的试验结论,并提出对于实验内容在临床上相关应用及意义。只有这样,学生才能通过实验加深对理论的理解,培养学生独立处理问题、解决问题的能力。例如,根据实验课教学大纲,细胞生物学第二次实验中有一个“红细胞膜通透性观察”实验。常规的教学方法就是由教师分别配制低渗、高渗、等渗8种试剂,利用人的血液在生理盐水下平衡,学生仅需要加入不同的试剂观察是否溶血,而后得出何种试剂能够发生溶血现象。在实际教学过程中,学生只是机械地做实验,而不能将实验内容与细胞膜的特性相联系,实验结束后学生仅仅掌握了溶血现象的观察,红细胞需要保存在等渗溶液中等一些表面现象。而无法加深对细胞膜通透性的理论知识的理解,实验课流于形式。针对该实验存在的一些问题,我们以本实验为突破口,开展了设计性和探索性实验。在具体教学环节上可做如下调整:
1.在理论课教学环节中,阐述细胞膜选择通透性的原理,并提出一系列问题,包括:
(1)为什么临床上输液需输入等渗溶液的?
(2)细胞膜针对不同分子其通透性有何变化?
(3)如何建立等渗溶液?
(4)水是如何通过细胞膜的?
(5)细胞的体积是如何维持的?
(6)肾脏是通过何种方式完成水和无机离子的重吸收?
2.由学生自己根据实验目的设计实验,设计内容包括实验目的,需要解决的问题,选择何种试剂和材料,采用何种试验方法。
3.学生也可采用实验指导书安排的方案,该种方式兼顾到对实验设计有困难的学生,可以完成基本的实验。
4.专门安排三个学时的实验课,组织学生针对自己的实验设计开展讨论,学生可以在讨论课上阐述自己的设计理念,设计思路,完成实验的可行性,在讨论阶段有些学生修改了自己的'设计,有些学生借鉴别人的建议完善了自己的设计方案,同时也进一步巩固了相关的理论知识。
5.学生完成实验,实验过程中做好实验记录,对实验过程中出现的问题提出假设,并进一步给予验证。
通过这种完整的实验设计训练,学生可以掌握科研设计的基本方法,同时结合理论与相关研究的最新进展充分发挥自己的主观能动性,提出自己的设计方案并通过实验进行验证。这样我们的实验过程从教师教学生被动的学习变成了学生主动的探求知识的过程,学生的学习积极性充分被调动起来。
三、评分标准的改革
原来的医学细胞生物学实验成绩主要是对实验报告的评分,其中包括实验目的、原理、操作步骤及观察结果记录,将这几项分别评分,并相加得到最终的分数,这就导致学生在书写报告时不用心,应付了事,抄袭现象严重。配合以上实验内容的改革,我们对评分标准也做了相应的改动。基础性实验评分重点放在讨论题及注意事项上。拓宽学生对实验基本技能在临床应用上的思考,培养学生在实验操作过程中发现问题、解决问题的能力。对于综合性、设计性实验,评分的重点要放在对实验设计的科学性、合理性以及实验相关内容扩展的评估上。通过这样的评分改革进一步提高学生主动学习的积极性。
通过一轮的教学改革,我们从学生完成的实验报告;医学细胞生物学期末考试情况分析及随机抽样调查问卷三个方面对教学效果进行了评价。参加实验教学改革的为206位20xx级临床医学专业学生,经过充分讨论全部完成了实验设计,其中90%的学生设计了与实验指导书不同的方案,部分学生还结合临床实践做了一些有益的探索,如针对肾小管上NH+4转运通道的研究,高渗与等渗混合液对红细胞膜的影响,ATP对葡萄糖的易化扩散作用的影响。去垢剂SDS对红细胞膜的影响,红细胞膜上水通道蛋白的研究等。此外,基础实验技术的实验完成效果也有明显提高,学生不仅能主动查阅相关文献扩展对基本技术应用的认识,而且对于实验的每一个细节都认真分析,在报告中提出了不少的注意事项与建议。
为了进一步验证实验课改革的效果,在医学细胞生物学期末考试试题中,安排了综合性设计实验相关的理论知识试题,其中90%的学生答对了该题,正确率远大于其他的题目。这说明通过学生自己的设计,对于红细胞膜的特性有一个深刻的认识,实验课教学加深了学生对理论知识的理解,对相关的理论知识起到了有益的补充作用,实验课教学改革达到了预期的效果。
此外,抽样调查结果表明:学生对教学改革满意度高,认为实验课能调动他们的积极性,这样的教学能让他们愿意去发现问题、解决问题。同时,在主动思考的过程中对课堂上的理论知识的掌握具有一定的促进作用,并对实验课的进一步改进提出了许多建议。
综上所述,我们根据教学实践过程中发现的一些问题做出的相应的实验课改革,在实际的教改过程中仍发现有许多不完善之处,还有待日后的进一步完善与补充。但教学改革的效果也是喜人的。我们应坚持这样的思路,将教学改革进行到底,对原有教学进行甄别,取其精华去其糟粕。摆脱教师机械讲授的“填鸭式”教学模式,提高学生学习的兴趣,改变学生的应试学习状态,为社会培养出具有独立思考能力,独立解决问题能力的合格的临床医学人才。
细胞生物学实验报告3
一、实验目的
了解细胞膜[1]的渗透性及各类物质进入细胞的速度[2]
二、实验原理
1、在等渗溶液中,细胞对各种溶质的透过性不同。有的溶质可以进入,有的溶质不能渗入。
2、渗入的溶质能提高细胞的渗透压,促进水分子进入细胞,引起溶血现象[3]。
3、不同的溶质渗入到细胞内的速度不同,因此溶血时间也不同。
三、实验材料
新鲜血液(鸡血、猪血、牛血等)
四、实验器材
试管(1.5cmX18cm)、试管架、10ml移液管、1ml移液管、200ml烧杯(2个)、250ml容量瓶、移液枪、胶头滴管、菜刀、吸球、电子天平、显微镜、盖玻片、载玻片、秒表
五、实验药品及试剂
0.17MNaCl、0.17MNH4Cl、0.17MNH4Ac、0.17MNaNO3、0.12MNa2SO4、0.12M草酸铵、0.32M葡萄糖、0.32M甘油、0.32M乙醇、0.32M丙酮、肝素抗凝剂[4]
六、实验步骤
1、制备血液稀释液
(1)抗凝剂的制备:首先称取1克肝素钠粉末,然后加入0.17MNaCl溶液10ml(1∶10的比例),混合均匀,制成肝素抗凝剂。
(2)血液稀释液的制备:取新鲜血液,按比例(肝素抗凝剂:血液=1∶10)混合均匀,配制成经肝素抗凝的血液[5][6]。
(3)按比例(经肝素抗凝的血液∶0.17MNaCl溶液=1∶10)混合均匀,形成一种不透明的红色液体[7]。
2、低渗溶液(空白对照)的观察
取试管一只,加入10ml蒸馏水,然后再加入1ml稀释的血液。注意观察溶液颜色的变化。结果是溶液由不透明的红色变为澄清。记录下这个过程所要的时间。
3、红血球的渗透性
按表一的配制,分别在下列十种等渗溶液中进行实验。轻轻摇动,注意有无颜色变化,是否有溶血现象发生,记下时间(自加入稀释血液到溶液逐渐由红色变为透明澄清,红血球全部溶血所需时间),填入表一的空格中。
4、显微观察
[1]何为细胞膜?[5]注意:这一步,动作要非常迅速,否则鸡血会凝固。或者先把抗凝剂加入到烧杯中,再加入新鲜的[2]鸡血,边加边震荡即可。为何不同物质进入细胞的速度不同?[6]为什么新鲜的鸡血会凝固?[3]何为溶血现象?[7]为什么这一步要使用0.17M的NaCl溶液?[4]你知道有哪些血液抗凝剂?
(1)血液红细胞的观察
滴一滴稀释的血液于载玻片上,盖上盖玻片。用光学显微镜观察细胞的种类、形状和颜色。
(2)细胞破碎的观察
在上一步的载玻片的.一端滴加清水,在另一端吸水,并在显微镜下观察细胞的破裂。
七、实验结果与分析
1、比较和分析你所观察到的实验结果,并解释原因。
结果:
(1)在所提供的试剂中不溶血的有:
(2)在所提供的试剂中不完全溶血的有:
(3)在所提供的试剂中完全溶血的有:
结果分析与比较:结论:
2、绘制你所观察到的血液细胞图。
3、讨论溶血实验在研究中应用的可能性。
细胞生物学实验报告4
骨髓检验报告的书写是检验专业学生《血液学检验》课程中非常重要的内容之一,在常见贫血、白血病等血液病的诊断、协助诊断和疗效观察过程中,临床医师需要反复抽取患者的骨髓送血液科进行骨髓检查,每次检查后检验医师都要填写骨髓检验报告,供临床医师诊断疾病,观察疗效,直到患者病情完全缓解出院为止。因此,骨髓检验报告单的填写质量要求非常高,一份良好的骨髓检验报告单是骨髓细胞特征的全部再现,是检验医师骨髓检验技术和对临床资料综合分析能力的高度体现,检验医师不仅需要较强的识别骨髓细胞形态的能力,写一份合格的骨髓检验报告更重要。学生在学习过程中,对骨髓检验报告的书写常感到非常困难,为了上好这一课,笔者在多年的教学过程中,积极探索,结合学生实际与临床实际,对骨髓检验报告单的书写探索出了一套较好的教学方法,能使学生在较短的教学时间里写好一份骨髓检验报告,并让学生通过骨髓检验报告单的书写,全面熟悉、掌握贫血及白血病等常见血液病的血象及骨髓象特征,学会分析骨髓象,掌握相关骨髓检验技术,并正确为常见血液病下诊断。现将教学方法交流如下。
1.总结出一套骨髓检验报告基本书写模板,要求学生根据所检验的血液病的血象和骨髓象特征,按照模板认真填写
根据教材及临床实际,骨髓检验报告单的书写具有一定规律,但对初学者学生来说,要写好一份骨髓检验报告单确是一件非常困难的事,为了让学生在课时数少的情况下尽快掌握书写技巧,笔者为学生总结出了一套骨髓检验报告单书写基本模板,供学生参考,要求学生按照模板要求认真分析骨髓象,填写不缺项。这样做可以帮助学生理清思路,有计划、有条理地去分析骨髓象,书写报告单,减少了学生走弯路的时间。
1.1一般情况下骨髓象书写基本格式
①取材满意、涂片染色良好。
②骨髓有核细胞增生程度,粒红比值。
③粒系细胞增生程度,所占比值,以哪1-2阶段的细胞为主,各阶段细胞形态特征。
④红系细胞增生程度,所占比值,以哪1-2阶段的细胞为主,各阶段细胞形态特征。成熟红细胞形态特点。
⑤淋巴细胞及单核细胞比值、形态特征。
⑥全片见到巨核细胞多少个,以哪1-2阶段细胞为主,各阶段细胞形态特点。血小板分布及形态特点。
⑦全片未见寄生虫及其他异常细胞。
1.2常见贫血的骨髓象书写格式
在报告基本格式的基础上,把“4、与3、”对换位置,并要求学生要特别重点描述幼红细胞形态改变,以及成熟红细胞形态改变特点,因为不同的贫血,幼红细胞和成熟红细胞形态都会出现不同的形态改变,这样有助于贫血的分类和诊断。
1.3常见白血病的骨髓象书写格式
在报告基本格式的基础上,根据白血病发生在哪个系,就将哪个系的白血病细胞改变情况放在第3条描写,第2条不用填写粒红比值,未发生白血病改变的其他系细胞受抑制。
例如,急性淋巴细胞白血病L1书写格式:
①取材满意、涂片染色良好。
②骨髓有核细胞增生极度活跃。
③淋巴系细胞增生极度活跃,以原始淋巴细胞为主,占65%,幼稚淋巴细胞占29%,原始淋巴细胞和幼稚淋巴细胞以小细胞为主,大小较一致,核型规则,细胞核染色质较粗,核仁1-2个,不太清楚,胞浆量少,退化细胞较多。
④红系及粒系细胞受抑制,细胞形态基本正常。
⑤全片见巨核细胞2个,血小板少见,形态基本正常。
⑥全片未见寄生虫及其他异常细胞。
2.认真批改学生写的骨髓检验报告,找出问题,并及时在课堂上讲评,指导学生及时纠正错误
一般情况下,就算是照着模板写报告,学生前几次所写的报告都会出现不少问题。如,常有一些学生在报告中没有描述成熟红细胞形态特点,血小板分布和形态,出现粒红比值计算结果错误,忽略第一条“取材满意、涂片染色良好”及最后一条“全片未见寄生虫及其他异常细胞”等。也会出现不知怎样描述异常幼红细胞形态特点和白血病细胞形态特点,难下诊断等问题。还会在报告文字描述中用一些口水话,写错字、涂改字等。因此,每次学生交来的骨髓检验报告,笔者都会认真批改,在报告上注明错误的地方,并把正确的答案也批在报告上。然后统计分析学生出现哪些问题,某种问题出现人数有多少等情况。在下一次的课堂上,笔者就会针对学生出现的问题一一讲评,对学生每一次的进步都给予表扬。而且,每一次讲评都做到讲深讲透。
2.1骨髓检验报告中学生问题分析:
2.1.1不填取材满意、涂片染色良好
这一条有的学生会不写,他们认为没必要,但笔者要求一定要写。因为这一条包含的意义在于检验医师应该首先检查临床医师送检的骨髓片是否是成功抽取的骨髓涂片,如果取材满意,才有对骨髓象进行分析的价值。随后检验医师对骨髓涂片要进行瑞特染色,染色良好的片子,骨髓细胞形态才好识别,才能有效分类骨髓细胞。因此,这一条的书写,可提醒学生要重视以上问题,对初学者来说是必须的。
2.1.2粒红比值算错
粒红比值是指检验医师所分类的骨髓细胞中全部粒系细胞数除以全部红系细胞数所得的值,这个值可以反映骨髓中粒系细胞和红系细胞所占比例是否在正常范围,表达方式以正常骨髓粒红比值为例,粒:红=2-4:1,有的同学会写成粒红比值1:2-4,这样一来,意义就完全不同了,一般是学生粗心大意和理解错误的结果,必须给予纠正,并说明道理。
2.1.3漏填成熟红细胞形态特点
成熟红细胞形态变化,在常见贫血的诊断中具有较大意义,不同的贫血,成熟红细胞形态会发生不同的改变。如巨幼细胞性贫血,骨髓象中成熟红细胞大小不均,以大细胞为主,红细胞中央淡染区不明显。因此,要求学生一定要重视成熟红细胞形态描述。
2.1.4漏填血小板分布及形态特点
血小板数量的减少、形态的异常,会影响机体止血和凝血的功能,导致机体组织、器官、粘膜容易出血,或出血不止。如再生障碍性贫血和常见白血病等患者的骨髓中一般会出现不同程度的血小板减少,或形态异常,检验医师对骨髓中血小板分布情况和形态改变的描述,可为临床医师提供患者出血原因,出血程度分析等参考依据,因此也很重要,要求学生不能省略或遗漏。
2.1.5忽略全片未见寄生虫及其他异常细胞
有些寄生虫病如疟疾、弓形虫病等,在骨髓中可发现相应的虫体或寄生虫滋养体等,如果是血液病合并寄生虫感染患者,发现寄生虫就可为临床医师提供有价值的诊断依据。
有些血液病可在骨髓中发现特殊异常细胞及病理细胞,如骨髓癌转移、戈谢病、尼曼匹克病等,如在骨髓中发现异常的癌细胞、特殊形态的戈谢细胞及尼曼匹克细胞,对相应的疾病有绝对的诊断意义。因此,写这一条,更重要的是提醒大家在观察分析骨髓象时要同时注意观察骨髓中是否存在寄生虫,是否存在特殊异常细胞,不管有没有,都要给临床医师一个明确的回答。
2.1.6异常幼红细胞形态特点和白血病细胞形态特点描述不清
出现这个问题主要有两个方面的原因:一是学生识别细胞能力不足,二是没有掌握相关血液病的.骨髓象特征,看不出特点,抓不住重点,不知该怎样描述。针对这个问题,笔者便结合相应血液病骨髓象进行认真分析,如典型的缺铁性贫血骨髓象幼红细胞改变特点为,幼红细胞胞体小,胞浆量少,胞浆边缘不整齐、嗜碱性,中晚幼红细胞核染色质浓缩、深染。同时加强骨髓细胞形态学改变投影演示、版图描绘、显微镜下指导,提高学生识别骨髓细胞能力及对血液病骨髓象特征掌握程度。
2.1.7正确下诊断困难
每一份骨髓检验报告都需要下一个诊断意见,为临床医师提出细胞学诊断意见或可供临床参考的意见。骨髓检查诊断疾病的性质一般分为明确诊断、符合诊断、提示性诊断和排出性诊断等,不同的血液病应该以不同的方式下不同的诊断,这需要检验人员具有较高的检验技术、较丰富的临床知识、以及将检验结果与临床资料相结合综合分析的能力。对于初学者学生来说,确实有一定困难。如巨幼细胞性贫血、各种白血病,通过骨髓检查可作出明确性诊断,缺铁性贫血只能做出符合性诊断等。但通过反复实验、修改报告,反复讲解相应血液病的诊断要点后,学生可以基本掌握常见血液病的诊断方法。
2.1.8在报告文字描述中用一些口水话,写错字、涂改字
骨髓检验报告要求内容简明扼要,突出重点,使用书面、专业语言,而且不能有任何涂改痕迹,因此对学生报告中出现口水话、写错字、涂改字等现象,笔者要求一定要改正,要求学生反复书写、反复修改报告,直到满意为止。并将作为平时成绩,纳入学期考试总成绩。
3.特别讲解常用化学染色在常见血液病的诊断中的重要作用
常用化学染色有过氧化物酶染色(POX)、特异性酯酶染色(SE)、非特异性酯酶染色(α-NAE)及氟化钠抑制实验,铁染色等。如POX、SE和α-NAE及氟化钠抑制实验对常见急性白血病(急性粒细胞白血病、急性单核细胞白血病、急性淋巴细胞白血病)的鉴别具有重要意义;铁染色,对缺铁性贫血诊断具有重要意义等。因此,要求学生在骨髓检验报告单中,做了化学染色的,必须填写化学染色结果。
4.强调血片检查在骨髓检验中的作用
许多血液病不仅骨髓象发生改变,而且血象也有相应改变。如常见急性白血病,不仅骨髓象可见到大量原始、幼稚白血病细胞,血片中也可查到大量一般绝对见不到的异常原始、幼稚细胞。因此,血涂片的检查和描写对血液病的诊断也很重要,学生也需要重视。
骨髓检验报告主要包括以下几部分的内容:骨髓象、血象、细胞化学染色结果、诊断意见及建议。笔者通过以上几个方面的反复教学,学生可在毕业前基本掌握常见血液病的骨髓检验报告书写方法,并正确下诊断,为学生将来服务社会奠定了良好基础。
细胞生物学实验报告5
“生命科学是本世纪发展最快的学科之一,作为生命科学的基础学科和前沿学科,《细胞生物学》是教育中重要的基础课程,与医学生后续课程的学习有密切联系,在学生的知识结构体系中占有重要的地位”[1]。“实验课是《》教学的重要组成部分,不仅有助于学生理解细胞生物学理论知识,让学生掌握细胞生物学基本研究技能,而且能启迪学生的科学思维,培养学生的创新意识和创新能力,对学生综合素质的发展具有直接而长远的影响”[2]。近年来,细胞生物学新理念和新技术层出不穷,涌现出了一系列具有先进性和实用性的新内容。“然而,由于《细胞生物学》不是临床技能考试的科目,因此其理论和实验的教学方法和手段长期落后于其他基础医学课程”[3],“实验课的教学从内容上和教学模式上大大滞后于理论课教学”[4]。在我校,细胞生物学是临床医学、口腔医学、预防医学、医学检验等专业的基础课。作为西部院校,由于教育经费不足,实验教学中存在诸多不适应时展的问题,如果不加以及时解决,将难以培养适应时展的高素质创新人才。为此,本文结合我校目前《细胞生物学》实验教学的实际情况,对存在的问题进行剖析,探讨实验教学改革的措施和方法。
1.《细胞生物学》实验教学存在的问题
1.1实验内容陈旧,教学模式单一
目前,我校《细胞生物学》实验课仅有12学时,由于学时少,仅开设了普通光学显微镜使用、显微测量法、生物作图基础、细胞形态结构的观察、细胞化学成分的显示和细胞有丝分裂标本的制备与观察。所开设的实验均为验证性实验,不仅内容陈旧,而且各个实验之间缺乏相互联系,造成实验教学与理论教学严重脱节,不利于学生创新精神的培养。原有的实验教学模式,还是“以教师为主体”进行填鸭式的教学。实验准备教师课前准备好实验仪器和相关试剂,上课时由主讲教师详细讲解实验原理和演示操作步骤,学生依照实验指导书的步骤完成规定的实验内容,按照教师给定的格式完成。整个过程中,学生只是被动地接受和效仿,不仅不利于对学生思维创新和能力的培养,而且也起不到应用实验教学培养学生综合素质能力的作用。
1.2教学实验设备落后
细胞生物学是一门发展非常迅速的学科,各种新技术、新方法和新仪器层出不穷。但我校目前却面临着实验设备数量严重不足的窘境,一些实验操作常常无法细化到每一位学生。另外,由于经费的原因,导致一些性能落后和老化的设备没能得到及时更新,无法开设涉及新技术和新方法的实验,严重挫伤了学生学习的积极性。
1.3考核评价体系不够科学
实验考核成绩以教师评价打分为主,以实验报告的成绩来评定,而对学生实验过程中的实验设计、实验方法和操作技能几乎不涉及,这种单一的评价方式无法避免教师单边倾向,忽略了实验过程中形成性评价,难以客观公正地评价学生的学习效果和学习主动性,不利于学生实验操作能力和科研创新能力的培养。
2.细胞生物学实验教学改革思路
2.1精选实验内容,改变单一教学模式
对原有实验教学内容进行认真筛选,剔除重复和过时的实验项目,补充反映学科发展前沿的新实验,增加实用性、设计实验比重,内容不断补充完善。把与《细胞工程》实验重复的`“细胞的原代培养”和“培养细胞的观察、记数及活力测定”删除,结合学科发展,增设设计性实验“应用细胞融合技术制备染色体提前凝集标本”及“细胞凋亡的诱导与形态学检测”,鼓励学生在设计性实验项目下进行大胆创新,开拓新的实验项目或课题。实验课采用多种教学方法调动学生主观能动性,如:设计性实验前安排学生自己配试剂,授课过程中综合运用多种教学方法,如:启发式、PBL模式、互动式展开教学,引导学生对实验进行分析,甚至改进实验方法和实验步骤;启发学生寻找问题、分析问题和解决问题,激发学生自主学习和探究学习的积极性。
2.2建立实验网络教学辅助平台
多媒体具有形象、逼真和直观等优点,一些难以观察清楚的现象、难度较大、不易开展的先进性实验,借助多媒体可以使其生动活泼、形象和直观地表现出来。细胞生物学发展的日新月异,让反映细胞生物学现展水平的实验,通过多媒体技术,将实验操作过程拍摄成录像,将实验结果拍摄成彩色显微图片介绍给学生。此外,通过网络收集或购买光盘资料,能获取一些具有代表性的高、精、尖实验技术的资料,用于构建实验网络教学辅助平台,开辟一个资源丰富的开放式网络教学平台,拓宽教学的时间和空间。网站内容包括实验大纲、实验内容、实验教案、多媒体课件、实验视频、练习自测实验动画、实验图片和虚拟实验等,扩大了实验教学的信息量和覆盖面,为学生提升实验技能和从事科学研究打下良好基础。
2.3完善考评体系,全面提高教学质量
作为实验教学过程的重要组成部分,科学地进行考核是提高学生学习积极性和保证教学质量的重要手段。考评体系应全面反映学生的实验态度、操作技能、实验过程中解决问题和分析问题的能力。为此,将实验考核细化为平时成绩(包括出勤率、实验态度和课堂表现等)、实验报告、设计性实验的实施和实验综合技能考试三大块,比例分别为20%,15%,25%,40%,实验考核成绩占总成绩的40%。这样,不仅可以加强学生对实验的重视程度,而且可以促进学生动手能力和创新能力的培养。教师在第一次开课时就将实验考核方案告知学生,使学生明确考核的评分标准和课程的最终评价体系。在教学过程中,任课教师还根据不同阶段的教学要求,灵活运用课堂讨论、实验报告、设计性实验等多种方式,了解学生的学习情况及存在问题,让考核贯穿全程,从而使实验课程考核向注重能力考核转变,使学生更加注重平时的自主学习。
总之,实验教学是《细胞生物学》课程不可缺少的重要组成部分,要构建适应时展的西部医学院校《细胞生物学》实验教学体系,就必须充分调动学生学习的主动性和积极性,充分发挥实验课教学的优势与特点,为培养适应时展的高素质医学人才创造条件。
细胞生物学实验报告6
实验:
观察人体口腔上皮细胞
目的要求:
1、制作和观察人体口腔上皮细胞的临时装片
2、认识人体口腔上皮细胞的结构
3、熟练画细胞结构图
材料用具:
显微镜、吸水纸、载玻片、盖玻片、生理盐水、碘液、镊子、纱布、漱口杯、牙签
方法步骤
(一)制作人口腔上皮细胞的临时装片
1、用纱布擦净载玻片、盖玻片(很薄,应轻擦)
2、在载玻片中央滴一滴生理盐水(0.9%),说明:为什么用0.9%的生理盐水,观察洋葱表皮装片用清水,都是为了让细胞所处的环境和它们所生活的环境相同,不至于胀破或变形,使细胞保持原状。
3、漱净口。目的:将口腔的饭粒清除,以保证所取的细胞纯度。
4、用牙签在口腔内壁轻划几下,将上面附有碎屑涂抹在生理盐水中,尽量涂均匀。
5、盖盖玻片。用镊子夹起盖玻片,使它的一侧先接触载玻片的.水滴,然后慢慢放平(注意:避免产生气泡)。
6、染色。
①在盖玻片一侧滴加稀碘液,②用吸水纸在盖玻片另一侧吸引,使染液
浸润标本的全部。
(二)用显微镜观察。
使用显微镜
①安放
②对光
③放置玻片标本,调节焦距,用眼观察,在视野中会看到被染成桔黄色的上皮细胞、
(三)绘图:
人体口腔上皮细胞模式图
(四)整理:清洁玻片,废物放在指定位置。
归纳讨论:人的口腔上皮细胞有哪些基本结构,植物细胞和动物细胞相同和不同之处。答:人的口腔上皮细胞的基本结构有细胞膜、细胞质和细胞核;植物细胞与动物细胞相比,细胞壁、叶绿体和液泡是植物细胞特有的。
实验时间:20xx年9月27日
细胞生物学实验报告7
一、实验目的:
1、掌握显示细胞中过氧化物酶反应的原理和方法。
2.了解细胞凋亡的生物学意义
3、掌握凋亡细胞的形态学检测方法
二、实验原理:
1、细胞内的过氧化物酶能把许多胺类氧化为有色化合物,用联苯胺处理标本,细胞内的过氧化物酶能把联苯胺氧化为蓝色的联苯胺蓝,进而变为棕色产物,因而可以根据颜色反应来判定过氧化物酶的有无或多少。中间产物蓝色联苯胺是不稳定的,无需酶的参加即可氧化为棕色化合物。
2、细胞凋亡是指细胞在生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命的过程。它是一个主动的、高度有序的,基因控制的,一系列酶参与的过程。
3、凋亡细胞形态学特征是:体积变小,细胞质浓缩;细胞核发生染色质凝聚和聚集于核膜周围(边缘化);细胞膜有小泡状形成;晚期细胞膜内陷形成大小不同的凋亡小体;根据细胞凋亡形态学特征进行显微观察是检测细胞凋亡的一种直观、可靠的方法。
三、实验步骤:
细胞中过氧化物酶的显示
1、在载片上滴一滴PBS缓冲液;
2、取骨髓细胞:用断颈法处死小鼠,立即剪取后肢,去除肌肉,剥出后肢股骨,剪开股骨一端,用牙签尖的'一端插入剪开的小孔中,抠取少许骨髓细胞置滴有PBS的载片上;
3、涂片:用另一玻片将骨髓细胞沿一个方向涂布推开,室温晾干;
4、媒染:在涂片上滴0.5%硫酸铜液,以盖满涂片为宜,处理30秒-1分钟。5、倾去硫酸铜液,直接滴入联苯胺混合液反应6分钟(以盖满涂片为宜)6、清水冲洗,番红复染2min。
7、镜检:清水冲洗,室温晾干,先低倍镜下观察,后换高倍镜下观察(油镜100×)
细胞凋亡的形态学检测与观察吉姆萨染色:
1、取细胞爬片置于小培养皿中(有细胞面朝上)2、生理盐水轻轻漂洗细胞3、95%乙醇固定5min
4、PBS缓冲液洗2次
5、吉姆萨染色液染色5min6、蒸馏水轻轻洗去染液
7、普通光学显微镜下观察。吖啶橙染色:
1、取细胞爬片置于小培养皿中(有细胞面朝上)2、生理盐水轻轻漂洗细胞
3、甲醇:冰醋酸(3:1)固定5min4、PBS缓冲液洗2次每次1min
5、0.01%吖啶橙染色液在避光环境下染色5min6、蒸馏水轻轻洗去染液
6、选用蓝光激发滤片在荧光显微镜下观察。
四、结果与分析:
1、根据随机选择的几个视野的统计,该样品的细胞凋亡率=227/506×100=44.9
Hela细胞凋亡过程中核染色质的形态变化(吖啶橙染色)
五、思考题:
1、细胞凋亡的调控机制
细胞凋亡是一个受基因调控、众多细胞膜受体和胞浆蛋白参与的细胞主动自杀过程,其触发因素多种多样,包括细胞内诱导因子和抑制因子对细胞凋亡的调控。
2、细胞凋亡的特征
凋亡细胞形态学特征是:体积变小,细胞质浓缩;细胞核发生染色质凝聚和聚集于核膜周围(边缘化);细胞膜有小泡状形成;晚期细胞膜内陷形成大小不同的凋亡小体。
3、研究细胞凋亡的方法
定性的研究方法:常规琼脂糖凝胶电泳、脉冲场倒转琼脂糖凝胶电泳、形态学观察(普通光学显微镜、透射电镜、荧光显微镜)
定量或半定量的研究方法:各种流式细胞仪方法、原位末端标记法、ELISA定量琼脂糖凝胶电泳。
细胞生物学实验报告8
一、实验目的:
1、通过对原核和真核各种形态细胞的光学显微镜观察,了解细胞的形态及其显微结构;
2、学习显微测量的方法,对细胞的大小有一直观认识。
二、实验材料和仪器:
小白鼠肝细胞切片;鸡血红细胞;蚕豆叶片横切片;
普通光学显微镜;目镜测微尺;镜台测微尺;载玻片;盖玻片。
三、实验步骤:
(一)细胞形态观察
l、动物细胞的观察
(1)人肝细胞切片:在显微镜下仔细观察肝细胞的形态构造。
(2)鸡血细胞涂片的观察:观察血细胞的组成;红细胞、白细胞、血小板的形态特点。
2、植物细胞的观察
取蚕豆叶片横切片的观察:注意表皮细胞和叶肉细胞的基本结构。
(二)细胞的.大小和测量
1、卸下目镜的上透镜,将目镜测微尺刻度向下装在目镜的焦平面上,再旋上目镜的上透镜。
2、将镜台测微尺刻度向上放在镜台上夹好,使测微尺分度位于视野中央。调焦至能看清镜台测微尺的分度。
3、小心移动镜台测微尺和转动目镜测微尺(如目镜测微尺分度模糊,可转动目镜上透镜进行调焦),使两尺左边的一直线重合,然后由左向右找出两尺另一次重合的直线。
4、记录两条重合线间目镜测微尺和镜台测微尺的格数。按下式计算目镜测微尺每格等于多少μm:
镜台测微尺的格数
目镜测微尺每格的微米数=———× 10
目镜测微尺的格数
四、实验结果:
1、目镜校正:40倍显微镜目镜测微尺每格的微米数=17/70=0.24
2、细胞大小的测量:
五、作业与思考:
1、血细胞按含量高低,主要含有:红细胞,白细胞,血小板。
白细胞最大,红细胞次之,血小板最小。红细胞:主要的功能是运送氧。白细胞:主要扮演了免疫的角色,当病菌侵入人体时,白细胞能穿过毛细血管壁,集中到病菌入侵部位,将病菌包围,吞噬。血小板:止血过程中起着重要作用。细胞形态见下图。
2、植物细胞一般比动物细胞大一些。形态图见下。
3、在不同放大倍数下,测定的细胞大小基本一致,但有一些偏差。放大倍数越大,在视野中同等实际距离下的两点视野距离更大,而更容易测量准确。
细胞生物学实验报告9
医学生物学是中医院校的基础课程,是一门实践性很强的学科。实验教学是医学生物学教学过程中重要的组成部分,实验教学效果的好坏直接影响课堂教学的效果和学生对医学生物学的兴趣。高年制的医学生是各医学院校重点培养的高层次医学人才,因此,对他们的要求远远高于五年制学生,除了要求他们掌握全面扎实的专业知识外,还要求他们具有较高的科研素质、创新能力和实践能力,进而全面提高高年制学生的综合素质,培养学生分析问题、解决问题的能力。基于此,实验教学改革成为我们教学的重点。笔者综合分析目前我室的生物学实验教学过程,除了基本的医学生物学实验外,还开设了现代生物学实验技术课,这门实验课主要包括细胞培养、细胞传代和染色体显带等实验;在进行观察体外培养细胞的基本形态这个实验时,对该实验进行几个方面的改革,主要包括对实验教学方法、实验内容设计和实验具体操作进行改进,经调查,改革后实验教学效果较好。
一、实验教学方法改革
观察体外培养细胞的基本形态这个生物学实验的目的有两个:
一是掌握倒置显微镜的使用方法;
二是让学生了解细胞的基本形态结构和体外培养细胞的生长状况。
这样,有助于学生理解细胞是生命有机体的基本结构单位。针对这个实验目的,我们采用多媒体教学和国内外文献教学相结合,从体外培养细胞的形态特征类型开始讲解,结合不同细胞的图片,逐步讲解。同时,结合实物演示(培养瓶中装有不同时间的培养细胞)给学生讲解体外培养细胞的生长状况和细胞培养中的污染情况,使学生对这个实验先有感官认识,然后让学生自己设计实验。
二、实验内容设计
在实验内容设计过程中,我们首先对实验室的实验条件和经费进行考虑,然后结合高年制学生的实际条件进行实验设计。我校高年制的学生在进行现代生物学实验技术学习时,已经完成了基本的医学生物学实验,如显微镜的观察、蟾蜍的解剖等基本实验,所以,在进行现代生物学实验技术时已经具备了一定的知识水平。高年制的学生分两组进行这个实验,每组为21人,结合我室的实验条件,倒置显微镜只有一台,要完成这个实验而且效果要好必须进行以下的实验设计:
(1)细胞的准备:培养瓶细胞的准备和24孔板细胞的准备。
(2)盖玻片的无菌准备。
(3)细胞固定试剂的选择。
(4)显微互动实验室进行固定细胞的观察;倒置显微镜进行培养瓶细胞的观察。
(5)进行实验结果的分析、讨论。
三、具体操作步骤的'改进
实验内容设计好以后,进行具体的操作步骤:
(1)将21个学生分为7组,每3人1组。
(2)以往实验是利用培养瓶培养细胞,但是只有一台倒置显微镜,所以改为24孔板内放置盖玻片培养细胞。
(3)每组进行培养细胞前准备。首先各组进行盖玻片的无菌处理,然后将无菌的盖玻片放入24孔板内。
(4)各组进行24孔板内细胞接种培养,即爬片。
(5)将有细胞的盖玻片取出,各组进行固定。
(6)第一组、第二组采用丙酮固定;第三组、第四组采用95%乙醇固定;第五组、第六组采用甲醛固定;第七组采用甲醇冰醋酸固定。
(7)在显微互动实验室进行细胞形态的观察。
(8)交叉进行倒置显微镜下观察培养瓶内的细胞。实验完成后进行实验报告的书写,内容包括实验原理、实验目的、实验设计及实验结果的讨论等。学生将固定的细胞和未固定细胞的形态观察进行讨论分析,讨论的过程较热烈,有的学生提出的问题特别有意义,这样既可以让每个学生参与实验,同时,又增强了同学提出问题、解决问题的能力。
针对观察体外培养细胞的基本形态这个实验,我们进行了以上这几个方面的改进,使学生在教学过程中的各个环节都主动参与并不断地提出新的问题。在这个过程中,学生得到锻炼的同时,教师也在教学中得到了学习,扩展了知识面。实验教学是树立学生实践观念,培养分析、解决实际问题能力,启迪学生创新思维,提高学生综合素质的重要环节。所以,在实验教学过程中,我们要不断地进行探索和改革,这样更有利于培养学生的新能力和科研素质。
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